来源：永利日期：2024-11-13(78)
宫颈癌是女性生殖系统中最常见的恶性肿瘤，年轻化和病死率呈逐年递增趋势。研究发现，宫颈癌是目前唯一一种已知明确病因的癌症，全球99%以上的宫颈癌病例都是由人乳头瘤病毒（HPV）所引起。通过早期筛查可发现宫颈病变，实现早期诊断、早期治疗。
HPV是一种DNA病毒，全称人乳头瘤病毒，会寄生在人体黏膜与皮肤的复层鳞状上皮。
HPV的持续感染，将其E7 DNA整合到宫颈上皮细胞基因组中，产生E7蛋白（致癌蛋白），它可以通过结合并降解视网膜母细胞瘤蛋白（pRb）途径，干扰细胞周期，使细胞无限增殖，此时会导致P16的过表达。
p16是一个抑癌蛋白，直接作用于细胞周期、抑制细胞分裂的基因。当细胞过度增生过程中，p16蛋白反馈性升高。已被证实在高危人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染中高度表达，被认为是宫颈癌前病变的替代标记物，可作为辅助诊断标志物区分CIN病变。
Ki-67是核抗原和细胞增值标记物，人细胞分裂期分为静止期（G0期）、G1期、S期、G2期和有丝分裂期（M期），其中G1期、S期、G2期和M期均有Ki-67表达，M期结束进入G0期后，Ki-67很快被降解。因此，Ki-67是反映肿瘤细胞活跃程度的重要靶标。
Ki-67和p16是宫颈癌组织病理检查中的两个重要靶标。
在同一细胞内同时检测到p16和Ki-67则预示着细胞周期失调和可能发展为癌症的HR-HPV感染。目前国外已进行了大量研究来评估p16/Ki-67双染检测在宫颈癌筛查中检测宫颈癌前病变的临床应用价值。
2012年，美国病理学家协会（CAP）和美国阴道镜和宫颈病理学会（ASCCP）联合发布了下生殖道HPV相关的鳞状病变的命名标准化计划（LAST）指南，最终认定p16是唯一有足够的临床研究数据证实其可用于宫颈癌前病变诊断的生物标志物。
2015年Besthesda指南*推荐免疫细胞化学可辅助细胞学诊断。同时，在使用的报告模板方面，指南推荐在细胞学报告中加入免疫细胞化学的结果，并写出临床意义。
*The Besthesda System for Reporting Cervical Cytology
2024年ASCCP重磅发布了第一个创新的“持久指南”（Enduring Guideline）——《使用p16/Ki67双染检测来管理HPV检测阳性个体的推荐》*。全球首个推荐p16/Ki-67细胞学双染检测用于优化宫颈癌初筛结果异常后的分流及管理的权威指南。
*Recommendations for Use of p16/Ki67 Dual Stain for Management of Individuals Testing Positive for Human Papillomavirus
p16/Ki-67细胞学双染检测是一种免疫细胞化学检测方法，用于同时定性检测宫颈细胞学制片中的p16和Ki-67蛋白。正常生理情况下p16的过度表达和Ki-67的表达是相互排斥的，不会发生在同一宫颈上皮细胞中。因此，p16/Ki-67共表达意味着HR-HPV诱导的细胞周期失调，预示着细胞周期失调和可能发展为癌症的HR-HPV感染。
灵敏度 | 特异性 | |
细胞学 | 66.4% | 95.4% |
双染 | 90.1% | 95.3% |
HPV | 96.4% | 90.2% |
p16/Ki-67免疫细胞学双染检测不依赖形态学，易于掌握。
－与细胞学检测相比，能增加诊断宫颈高级别上皮内病变（CIN2+）的灵敏性，降低漏诊率。
－与HPV核酸检测相比，它能区分病毒的一过性感染和持续性感染，增加宫颈癌诊断中的灵敏度和特异性及准确性。减少延误诊断的同时减少阴道镜转诊的数量，对于宫颈癌初筛异常后的分流及管理有重要的临床参考价值。
p16/Ki-67在细胞学及HPV检测后的分流、细胞学分类、监测复发等环节中具有重要作用，主要体现在以下几个方面。
HPV感染的结果差异很大，HPV阳性女性的随访复杂且费力。p16/Ki-67双重染色对HPV 阳性女性进行分流的敏感性为74.9%，显著高于巴氏细胞学检查的51.9%，而特异性相当[1]。
被诊断为ASCUS 和LSIL 的女性5 年CIN3+ 风险分别为2.6% 和5.2%[6]。因此，从ASCUS/LSIL 中识别出潜在的HSIL至关重要。p16/Ki-67双染色检测CIN3的特异性为75.2%，显着高于HPV检测的40.4%[2][3][4][5]。p16/Ki-67双重染色对于高级别CIN也具有较高的阳性预测价值，特别是对于30岁以下的女性，这可以减少不必要的阴道镜转诊次数[3][4][7]。
p16/Ki-67双染色与HR-HPV检测相结合也可用于监测CIN2+（rCIN2+）的复发情况。p16/Ki-67和HR-HPV联合检测的敏感性与细胞学/HR-HPV联合检测相似（87.2% vs. 89.7%），但特异性显着提高（74.2% vs. 58.1%），这导致了更高的阳性预测值和更少的阴道镜转诊[8]。
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参考文献：
[1]. Wright TC Jr, Behrens CM, Ranger-Moore J, Rehm S, Sharma A, Stoler MH. et al. Triaging HPV-positive women with p16/Ki-67 dual-stained cytology: Results from a sub-study nested into the ATHENA trial.[J].Gynecol Oncol. 2017;144:51–6.
[2]. Schmidt D, Bergeron C, Denton KJ, Ridder R, European CCSG. p16/ki-67 dual-stain cytology in the triage of ASCUS and LSIL papanicolaou cytology: results from the European equivocal or mildly abnormal Papanicolaou cytology study.[J].Cancer Cytopathol. 2011;119:158–66
[3]. Uijterwaal MH, Witte BI, Van Kemenade FJ, Rijkaart D, Ridder R, Berkhof J. et al. Triaging borderline/mild dyskaryotic Pap cytology with p16/Ki-67 dual-stained cytology testing: cross-sectional and longitudinal outcome study.[J].Int J Cancer. 2015;136:2361–8.
[4]. Bergeron C, Ikenberg H, Sideri M, Denton K, Bogers J, Schmidt D. et al. Prospective evaluation of p16/Ki-67 dual-stained cytology for managing women with abnormal Papanicolaou cytology: PALMS study results.[J].Cytopathol. 2015;123:373–81.
[5]. White C, Bakhiet S, Bates M, Keegan H, Pilkington L, Ruttle C. et al. Triage of LSIL/ASC-US with p16/Ki-67 dual staining and human papillomavirus testing: a 2-year prospective study. [J].Cytopathology. 2016;27:269–76.
[6].Katki HA, Schiffman M, Castle PE, Fetterman B, Poitras NE, Lorey T. et al. Benchmarking CIN 3+ risk as the basis for incorporating HPV and Pap cotesting into cervical screening and management guidelines.[J] Low Genit Tract Dis. 2013;17:S28–35.
[7]. Yu LL, Chen W, Lei XQ, Qin Y, Wu ZN, Pan QJ. et al. Evaluation of p16/Ki-67 dual staining in detection of cervical precancer and cancers: a multicenter study in China.[J].Oncotarget. 2016;7:21181–9
[8]. Polman NJ, Uijterwaal MH, Witte BI, Berkhof J, van Kemenade FJ, Spruijt JWM. et al. Good performance of p16/ki-67 dual-stained cytology for surveillance of women treated for high-grade CIN. [J]. Int J Cancer. 2017;140:423–30.
[9].Yu L, Fei L, Liu X, Pi X, Wang L, Chen S. Application of p16/Ki-67 dual-staining cytology in cervical cancers. [J]. J Cancer. 2019 Jun 2;10(12):2654-2660.
[10].Clarke MA, Wentzensen N, Perkins RB, Garcia F, Arrindell D, Chelmow D, Cheung LC, Darragh TM, Egemen D, Guido R, Huh W, Locke A, Lorey TS, Nayar R, Risley C, Saslow D, Smith RA, Unger ER, Massad LS; Enduring Consensus Cervical Cancer Screening and Management Guidelines Committee. Recommendations for Use of p16/Ki67 Dual Stain for Management of Individuals Testing Positive for Human Papillomavirus. J Low Genit Tract Dis. 2024 Mar 6.
